第1434章 摸着石头过河 海与夏
是我的老本行,我在海德堡的时候做过类似的实验。“
“好,“杨平点头,“韦伯教授负责体外验证,伊娃负责闭环传感器升级,莉娜负责数据分析模型,汉斯负责病毒载体和光纤制备。唐顺,你协调所有资源,确保一周内出结果。“
“明白!“
体外验证开始。
韦伯亲自主刀,从7的脊髓损伤区取了一小块组织,大约两立方毫米,放在冰冷的人工脑脊液中,切成了三百微米厚的薄片。这些薄片被转移到培养皿中,保持存活状态,可以持续记录电生理活动四到六个小时。
病毒载体是aav9-hsyn-nphr-eyfp,一种经过改造的腺相关病毒。aav9对神经元有高度的嗜性,hsyn启动子确保nphr只在神经元中表达,eyfp作为荧光标记,方便在显微镜下观察转染效率。
韦伯把病毒溶液滴在脊髓切片上,孵育两个小时。然后用pbs冲洗三遍,放在共聚焦显微镜下观察。
“转染效率,“他调整着焦距,“大约百分之三十五。“
“百分之三十五,“曼因斯坦在旁边记录,“够吗?“
“理论上,脊髓背角的抑制性中间神经元占总神经元数量的百分之二十到三十。百分之三十五的转染效率,意味着大部分抑制性神经元都能被靶向,足够了。“
下一步是电生理验证,韦伯把一片转染过的脊髓切片放到电生理记录槽中,用玻璃微电极记录背角神经元的自发放电。同时,他在切片的上方放置了一根直径两百微米的光纤,连接到一台黄色激光器上。
“基线放电频率,“他看着示波器,“每秒五赫兹,正常范围。“
然后他打开了激光器。一束微弱的黄光透过光纤,照射在脊髓切片的表面。
“光强,一毫瓦每平方毫米,波长,五百九十纳米。“
示波器上的波形变了,自发放电频率从每秒五赫兹降到了每秒一赫兹,降幅百分之八十。
“抑制效果确认,“韦伯的声音很平静,但曼因斯坦注意到他的手微微颤抖,“nphr被激活后,氯离子内流,神经元超极化,放电减少。“
“可逆吗?“杨平问。
韦伯关掉激光器,十秒钟后,放电频率恢复到每秒四点八赫兹。
“完全可逆。“
会议室里爆发出一阵压抑的欢呼。唐顺和汉斯击了一下掌,莉娜在笔记本上飞快地敲着字,伊娃难得地露出了一丝微笑。
但韦伯没有笑,他盯着那片脊髓切片,看了很久,然后说:“这只是体外,体内的环境复杂得多,炎症、免疫反应、胶质瘢痕、血流变化。体外成功,不代表体内能成功。“
“我知道,“杨平说,“但我们至少证明了,这个方向是对的,科研就是摸着石头过河。“
“摸着石头过河?”
韦伯捉摸着这句话,他赞叹:
“这是富有哲理的一句话。”
紧接着,体内实验也开始进行。
这一次,手术的规模比前两次都大。杨平主刀,曼因斯坦协助,伊娃负责电生理监测,汉斯负责病毒注射和光纤植入,韦伯在台下观摩。
手术的第一步,是病毒注射
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